Новый очаг клещевого риккетсиоза в Называевском районе Омской области

В современный период продолжается формирование ареала R. sibirica, что проявляется наряду с уменьшением эпидемической активности и даже угасанием отдельных очагов процессом формирования новых эпидемически активных очагов клещевого риккетсиоза по границам нозоареала этой инфекции, например в Новосибирской, Тюменской, Курганской областях. Выявлены и изучены очаги клещевого риккетсиоза в Сузунском районе Новосибирской области (Н.В. Рудаков и др., 1990) и Сяадковском районе Тюменской области (Н.В. Рудаков, А.С Оберт, 2001), отмечается активизация очагов в ряде ландшафтных зон Алтайского края, на других эндемичных территориях (Н.В. Рудаков и др., 1988,1989). Начиная с 2003 г., в Называевском районе Омской области стали отмечаться случаи заболеваний с характерными для клещевого риккетсиоза клинико-эпидемиологическими данными. Заболеваемость КР регистрируется на территориях, примыкающих к Называевскому району в Сладковском районе Тюменской области и Северо-Казахстанской области с наиболее высоким уровнем заболеваемости данной инфекцией в Республике Казахстан.

В 2009 г. впервые серологически (РСК с антигеном R. sibirica) подтвержден случай клещевого риккетсиоза в Называевском районе Омской области. Иксодофауна этого района представлена двумя видами клещей - степной клещ (Dermacentor marginatus Shulz.) и луговой клещ (Dermacentor reticuatus Fab г.).

Целью данной работы являлось изучение нового очага клещевого риккетсиоза на территории Омской области.

Материалы и методы. Сбор иксодовых клещей осуществлялся на стандартную волокушу (флаг) по общепринятым методикам в период сезонного пика численности в августе 2009 г. и в начале мая 2010 и 2011 гг. в окрестностях населенных пунктов Князево и Дурбет, откуда поступало наибольшее количество больных с клинической картиной, типичной для клещевого риккетсиоза. Всего было собрано 873 экземпляра иксодид. Идентификация клещей была проведена научным сотрудником ОмскНИИПОИ А.К. Танцевым при консультативной помощи д.б.н. М.Г. Мальковой. Инфицированность переносчиков риккетсиями определялась с помощью стандартного гемоцитового теста, а также методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием праймеров RP877p и RP1258n, амплифицирующих фрагмент gltA гена (Roux V. et al., 1997), и праймеров 190.70, 190.180 и 190.701, амплифицирующих фрагмент отрА гена (RouxV. et al, 1996).

Изоляцию штаммов риккетсий проведали в биопробах на морских свинках-самцах (П.Ф. Здродовский, Е.М. Голиневич, 1972) с дальнейшим пассированием полученного материала на культуре клеток Vero. Выращивание монослоя клеток и их заражение выполняли, как описано ранее (Л.В. Кумпан и др., 2008).

Результаты и обсуждение. Иксодовые клещи, собранные на волокушу (флаг), были представлены двумя видами D. marginatus и D. reticulatus. Весной в сборах преобладали клещи D. marginatus - 61,16 % в 2010 г. и 77,78 °/о в 2011 г. Осенью в сборе доминировал вид D. reticulatus - 69,1 %. По результатам изучения инфицированности переносчиков, собранных весной 2010 г., с помощью гемоцитового теста риккетсий группы КПЛ содержались в 49 + 0,7 % клещей.

Из клещей D. marginatus, собранных в мае 2010 года, в биопробе на морских свинках выделены 2 штамма, не идентифицированных до вида риккетсий группы КПЛ. При внутрибрюшинном заражении морских свинок-самцов весом 300-350 г. 10 %-ный суспензией из иксодид (по 50 экземпляров на одну биопробу) на 4-5-й день отмечалось повышение температуры и наличие скротального феномена. При вскрытии наблюдалась типичная для клещевого риккетсиоза патолого-анатомическая картина: увеличение и гиперемия паховых лимфоузлов и тестикул, увеличение и зернистость печени и селезенки. Накопление риккетсий в мазках-отпечатках различных органов (лимфоузлы, тестикулы, селезенка, печень, мозг) от единичных до 75 экземпляров в поле зрения, наибольшее количество риккетсий отмечалось в тестикулах и селезенке. Исследование сывороток крови зараженных животных в РСК с коммерческим антигеном R. sibirica выявило сероконверсию в титрах 1:20+++, в РСК с антигеном R. tarasevichiae (риккетсий предковой группы) сероконверсия не выявлена.

В дальнейшем 20 %-ными суспензиями органов биопробных животных (селезенка и мозг) заражали культуру клеток Vero. Для определения уровня накопления риккетсий после каждого пассажа из зараженной культуры клеток готовили препарат-мазок с последующей окраской по методу Здродовского. При пассировании материала в течение 3-х недель накопление риккетсий составляло от 20 до 40 микробных тел в каждом поле зрения. В ПЦР с праймерами, амплифицирующими фрагмент gltA гена, получены положительные результаты в изолятах обоих штаммов, накопленных на клеточных культурах. Кроме того, в органах морской свинки № 28, зараженной суспензией из клещей D. marginatus, собранных в окрестностях с. Дурбет, получены положительные результаты в ПЦР с праймерами, амплифицирующими фрагмент отрА гена.

133 экземпляра клещей D. marginatus и 39 экземпляров D. reticulatus из полевого сбора 2011 г. были исследованы на наличие ДНК риккетсий в ПЦР с праймерами, амплифицирующими фрагмент гена цитратсинтазы. ДНК риккетсий выявлена в 25 экземплярах D. marginatus (18,8+3,4 %) и в 2 экземплярах D. reticulatus. С праймерами, амплифицирующими фрагмент отрА гена, исследовано 69 экземпляров клещей D. marginatus и 2 экземпляра D. reticulatus. Положительными из них оказались 18 экземпляров D. marginatus (26,1+5,3%) и 1 экземпляр D .reticulatus (исследовались только образцы, положительные по gltA гену).

В Называевском районе впервые в 2003 г. выявлен единичный случай острого лихорадочного заболевания, возникшего после присасывания клеща. Пациент в возрасте 40 лет поступил на 5-й день заболевания с температурой до 39°С, обильной петехиальной сыпью на всем теле и первичным аффектом в месте присасывания клеща. Инкубационный период составил 4 дня, после чего через 3 дня появилась сыпь, С 2006 года случаи подобного заболевания регистрируются ежегодно. Всего за этот период из 13 населенных пунктов района в ЦРБ поступило 66 пациентов с характерной для КР клинической картиной, большинство заболевших проживало в селах Князево, Кизляки и Дурбет.

У взрослых пациентов преобладала среднетяжелая форма заболевания, у детей и молодых людей - легкая, 5 пациентов из всех поступивших отрицали факт присасывания клеща. Инкубационный период составил в среднем от 2 до 5 дней, длительность лихорадки - до 10 дней, ко при раннем обращении сокращалась до 5-7 дней. Розеолезные высыпания у 70 % бальных появлялись на 3-й день болезни, в остальных случаях - через сутки, при позднем обращении (на 5 -7-е сутки лихорадки) сыпь имела розеолезно-петехиальный характер. Практически у всех пациентов обнаружен первичный аффект (корочка с инфильтратом) с регионарным лимфаденитом, при локализации места присасывания на нижних конечностях нередко возникали флебит и отек голени или голеностопного сустава.

Основным клиническим симптомом удетей являлся регионарный лимфаденит (лимфоузлы умеренно-болезненные, плотные), сопровождавшийся субфебрильной или нормальной температурой, при своевременно начатой антибактериальной терапии высыпания не обнаруживались, лимфаденит сохранялся до 2 недель.

Таким образом, в результате проведенных исследований установлено существование в Называевском районе Омской области нового природного очага клещевого риккетсиоза, эпидемическое проявление которого отмечается с 2003 г. Места заражения людей находятся в ареале D. marginatus и D. reticulatus, чем объясняется весенне-осенняя сезонность заболеваний. Положительные результаты лабораторного исследования клещей этих видов на инфицированность риккетсиями, а также выделение двух штаммов риккетсий группы КПЛ из клещей D. marginatus свидетельствуют, что они являются вероятным резервуаром и переносчиком риккетсий в выявленном очаге.

»Испытание препаратов Фитоверм и Фос против иксодовых клещей в республике Алтай

»К проблеме изменчивости генома вирусов клещевого энцефалита

»Клинико-эпидемиологический анализ клещевого боррелиоза в Краснодарском крае

»Молекулярно-генетическая характеристика штаммов вируса клещевого энцефалита, обладающих различной патогенностью для человека

»Мультизараженность иксодовых клещей возбудителями вирусно-бактериальных инфекций в республике Беларусь

»Клинико-эпидемиологические особенности иксодового клещевого боррелиоза на территории Саратовской области