Зараженность иксодовых клещей вирусом клещевого энцефалита в Турочакском и Шебалинском районах республики Алтай

Т. И. Борисова, О.В. Мельникова, Е.Л. Сидорова, Л.Д. Щучинова, Е.М Андаев, А.Я. Никитин
ФГУЗ «Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока» Роспотребнадзора, г. Иркутск,
Управление Роспотребнадзора по Республике Алтай, г. Горно-Алтайск

Эпидемиологическая ситуация по клещевому энцефалиту (КЭ) в Республике Алтай остается напряженной. Показатели заболеваемости КЭ на 100 тыс. населения в 2009-2010 гг. составили 25,3-21,3 соответственно и являются самыми высокими в Сибирском федеральном округе, превысив средний уровень по округу в 3-4 раза. К особенностям КЭ в республике можно также отнести высокий уровень вирусофорности иксодовых клещей (среднемноголетний показатель 13 %) и значительную величину иммунной прослойки населения: в 2009 и 2010 гг. 58,5 и 52,1 % соответственно.

Цель исследования - оценка уровня вирусофорности иксодовых клещей в Турочакском и Шебалинском районах Республики Алтай и характеристика биологических свойств вируса КЭ.

Материалы и методы. Имаго клещей (Ixodes persulcatus ~ 909 экз., Haemaphysalis concinna - 5 экз., Dermacentor silvarum - 2 экз.) собраны в 2009 г. с растительности в Турочакском и Шебалинском районах Республики Алтай.

Клещей (740 экз.) исследовали на зараженность вирусом КЭ в ИФА индивидуально с помощью иммуноферментного анализа (тест-система «Вирион» ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ Томск-Москва). Изоляцию вируса КЭ из суспензий клещей (220 образцов) проводили в культуре клеток СПЭВ, выращенной во флаконах. При отсутствии цитопатического эффекта делали слепой пассаж. Для идентификации вируса использовали реакцию непрямой иммунофлуоресценции. Биологические свойства изолятов вируса КЭ изучали на беспородных белых мышах по общепринятым методам.

Гемагглютинирующую активность изучали в РГА по общепринятой методике.

Генотипирование штаммов проводили в ОТ-ПЦР в режиме реального времени гибридизационно-флуоресцентным методом с меченными генотип-специфическими флуоресцентными зондами на экспериментальной тест-системе для генотипирования вируса КЭ (ФГУН «ЦНИИ эпидемиологии», Москва).

Результаты и обсуждение, Турочакский район находится на северо-востоке республики в низкогорной части. Его площадь составляет 110515 км2, численность населения - 13 900 человек. Климат района более мягкий, чем в среднем по Горному Алтаю. Шебалинский район расположен в центральной части республики. Площадь - 3794 км2, численность населения 14504 человека. Климат района умеренно континентальный, характерный для северных районов республики.

В клещах I. persulcatus из Турочакского района (473 экз.) антиген вируса КЭ обнаружен в двух особях (0,42 ±0,29%).

Вирусофорность клещей I. persulcatus из Шебалинского района (267 особей трех видов) составила 1,12 ± 0,64 %. Значения вирусофорности более чем в два раза ниже по сравнению с результатами 2009 г., полученными ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Алтай»: в Турочакском районе 2,4 ± 2,4%, в Шебалинском -11,1 ± 6,1 %. Вероятно, различия обусловлены применением специалистами Центра и ФГУЗ «ИркутскНИПЧИ Сибири и ДВ» Роспотребнадзора тест-систем от разных производителей: «Вирион» ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ (Томск-Москва) и «Вектор-Бест» (г. Новосибирск) соответственно. Однако важно подчеркнуть, что в обоих исследованиях доля особей, зараженных вирусом КЭ, была выше у клещей, собранных на территории Шебалинского района, хотя известно, что заболеваемость населения в нем ниже, чем в Турочакском.

Из 220 суспензий клещей в культуре клеток получено 4 изолята (1,8 ± 0,90 %) вируса КЭ. Все они обладали гемагглютинирующей активностью с титрами в РГА от 1:40 до 1:320.

У трех изолятов вируса КЭ изучена вирулентность для беспородных белых мышей массой 6-8 г. При внутримозговом заражении гибель наблюдали на 4-12-е, а при подкожном - на 5-13-е сутки. Титры инфекционной активности при внутримозговом заражении колебались от 8,23 до 9,44 lg ЛД 50/мл, при подкожном - от 8,30 до 8,47 lg ЛД50/мл. Все штаммы высоковирулентны и имеют индекс инвазивности ниже 0,93.

По результатам геногипирования два штамма определены как сибирский подтип, один - как микст-штамм, содержащий последовательности генома сибирского и дальневосточного подтипов. В ранее опубликованной работе (Морозова, Гришечкин и др., 2011) все изаляты вируса КЭ, выделенные из иксодовых клещей, собранных в 2007 г. в окрестностях поселка Манжерок Майминского района Республики Алтай, отнесены к сибирскому подтипу.

Таким образом, природные очаги клещевого энцефалита в Турочакском и Шебалинском районах Республики Алтай сохраняют свою высокую активность. Инфицированность переносчиков на исследуемых участках значительно различается, что подтверждено независимыми параллельными оценками. Изаляты вируса КЭ высоковирулентны для белых мышей. Высокая вирулентность возбудителя определяет его способность вызывать быстрое проявление болезни и обуславливать тяжесть ее течения. Генотипированием штаммов установлена циркуляция на эндемичной территории сибирского субтипа, а также микст-варианта (выявлен в популяции вируса КЭ из Шебалинского района).

В дальнейшем необходимы продолжение вирусологического мониторинга на изученных участках природных очагов и расширение географии исследований по другим районам Республики Алтай для анализа связи циркуляции доминирующих подтипов КЭ с эпидемиологической напряженностью и клиническими формами болезни, проявляющимися у населения на этих территориях.

Другие публикации:

»Актуальные проблемы клещевого энцефалита и других переносимых иксодовыми клещами инфекций

»Анализ параметров паразитарной системы клещевого энцефалита в окрестностях новосибирска и их влияния на заболеваемость населения с 1980 по 2010 г.

»Взаимоотношения иксодовых клещей с риккетсиями.

»Восприимчивость кровососущих членистоногих к риккетсиям.

»Генетическое разнообразие вируса клещевого энцефалита на территории новосибирского научного центра

»Изменение границ ареалов пастбищных иксодовых клещей на территории западной Сибири: возможные причины и последствия.