Разработка приемов повышения чувствительности методов выделения риккетсий

Основные направления эпидемиологического надзора за риккетсиозами
Конструирование и сравнительное испытание иммуноферментных коньюгатов
Результаты сопоставления методов мониторинга риккетсий группы клещевых пятнистых лихорадок
Разработка приемов повышения чувствительности методов выделения риккетсий
Использование методов микроанализа для идентификации штаммов риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки
Заключение

Для идентификации штаммов риккетсий группы КПЛ из районов Сибири использован комплекс иммунологических и молекулярно-биологических методов. Для группоспецифической идентификации использовали микромодификацию РСК с сыворотками крови морских свинок и цельнорастворимыми антигенами музейных и оригинальных штаммов R. sibirica, R. conorii и R. akari МФА с корпускулярными антигенами (мазки-отпечатки желточных мешков), ИФА, РНГА с иммуноглобулиновым диагностикумом для выявления риккетсий группы КПЛ, для видовой идентификации - РСК с сыворотками мышей СВА, рестрикционный анализ ДНК риккетсий. Получены данные об отличиях активности цельнорастворимых антигенов различных видов риккетсий группы КПЛ, в частности R. sibirica, R. conorii и R. akari, в ИФА, РСК и РНГА с иммуноглобулиновым диагностикумом, а также антигенов различных штаммов R. sibirica в ИФА, Так, несмотря на то, что в ИФА положительно реагировали все использованные антигены риккетсий этой группы, т.е. в ИФА осуществлялась группоспецифическая идентификация, наиболее высокие показатели получены с антигенами R. akari, близкие результаты получены в РСК с сыворотками крови морских свинок (таблица 28). В то же время при исследовании антигенов R. akari в РНГА с иммуноглобулиновым диагностикумом для выявления риккетсий группы КПЛ получены отрицательные результаты в начальных разведениях в отличие от антигенов R. sibirica (титры в РНГА 1:32-1:128), что может использоваться для межвидовой дифференциации. Разработан способ дифференциации риккетсий вида Kakari от R. sibirica» (А.с. № 1756358. Авторы Н.В. Рудаков, С.Н. Шпынов - Бюл. изобретений, 1992. - № 31), позволяющий упростить и ускорить идентификацию штаммов.

С помощью РСК в модификации с набором антигенов риккетсий группы КПЛ и сывороток крови мышей СВА и рестрикционного анализа ДНК риккетсий проведена идентификация 8 штаммов риккетсий из районов Западной Сибири. Все они отнесены к R. sibirica, 7 из них депонированы во Всероссийском музее риккетсиальных культур (НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН). В дальнейшем эти данные дополнены результатами изучения ДНК риккетсий этих штаммов (Н.М. Балаева и др., 1993, 1994). Полученные данные подтверждают принадлежность изученных штаммов к R. sibirica и свидетельствуют о высокой консервативности генома этого возбудителя.