Заключение

Основные направления эпидемиологического надзора за риккетсиозами
Конструирование и сравнительное испытание иммуноферментных коньюгатов
Результаты сопоставления методов мониторинга риккетсий группы клещевых пятнистых лихорадок
Разработка приемов повышения чувствительности методов выделения риккетсий
Использование методов микроанализа для идентификации штаммов риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки
Заключение

Полученные нами результаты позволяют предположить, что наряду с R. sibirica на обследованных территориях распространены другие виды риккетсий группы КПЛ, широта распространения и эпидемическая значимость которых требует дополнительного изучения. Отличающиеся от R. sibirica по молекулярно-биологическим и антигенным характеристикам, уровням вертикальной передачи и вирулентности риккетсий группы КПЛ занимают существенное место в структуре популяций риккетсий как территориях с высоким уровнем заболеваемости КР, так и на территориях с отсутствием заболеваемости этой инфекцией.

В связи с отсутствием эффективных методических подход для изучения авирулентных риккетсий клещевого биотипа особенностей их экологии (тесные экологические и эволюционные связи с иксодовыми клещами) для получения новых дани о структуре их популяций нами была использована клещевая экспериментальная модель в сочетании с методами индикации и идентификации. Моделирование естественного цикла репродукции иксодид позволило выявить гетерогенность риккетсий по уровню вертикальной передачи, антигенным свойствам, вирулентности, а также изменение антигенной структуры риккетсий зависимости от фазы метаморфоза переносчиков.

При изучении спонтанно инфицированных имаго D. nuttalli, из эпидемически активного очага КР в Республике Алтай бы выявлены различия уровня вертикальной передачи возбудите наиболее выраженные в первой генерации клещей: диапазон ТО составил 10,0-100,0 %, ТПФ - 6,0-100,0 %. Из изученных 13 экспериментальных линий D. nuttalli только в трех линиях удалось получить три и более генерации клещей. В этих линиях D. nuttalli отмечается увеличение доли инфицированных личинок и ним из поколения в поколение.

Установлен также феномен значительного повышения концентрации риккетсий после питания голодных переносчиков. На основании результатов однофакторного дисперсионного анализа в двух линиях D.nuttalli выявлены достоверные различия между уровнем накопления риккетсий в личинках и нимфах, а также в преимагинальных стадиях клещей этих же линий до и после кровопитания.

Анализ антигенной структуры риккетсий, пассировавшихся в различных экспериментальных линиях D. nuttalli, показал их отличие как от штаммов R. sibirica, так и между собой. Также было выявлено изменение антигенной структуры риккетсий в зависимости от фазы метаморфоза переносчика: риккетсий, содержащиеся в клещах личиночной стадии по результатам МФА с использованием МКА, как правило, не имели поверхностных белковых антигенных детерминант (rОтрА) риккетсий группы КПЛ. Риккетсий экспериментальных линий D. nuttalli, в которых удалось получить 3-5 последовательных генераций иксодид, были авирулентны для морских свинок. Они не только не вызывали клинической картины КР, но и не давали сероконверсии в РСК к антигену R. sibirica. Следовательно, клещевая экспериментальная модель является эффективным методом культивирования (и, возможно, селекции) авирулентных риккетсий группы КПЛ.

Впервые экспериментально показана принципиальная возможность интерференции между авирулентными и вирулентными штаммами риккетсий группы КПЛ в азиатской части бывшего СССР в условиях интерцеломального заражения спонтанно инфицированных авирулентными риккетсиями казахстанского биотипа генетически идентифицированным вирулентным алтайским штаммом R. sibirica. Указанный феномен может оказывать существенное влияние на циркуляцию различных по антигенным и вирулентным свойствам риккетсий группы КПЛ и степень эпидемического проявления очагов КР.

Впервые выявлены выраженные отличия изолированных в эпидемически активных очагах КР и на территориях с отсутствием заболеваемости этой инфекцией риккетсиальных агентов по вирулентности, молекулярно-биологическим, антигенным и иммуногенным характеристикам, уровню трансовариальной и трансфазовой передачи, а также их гетерогенность по перечисленным признакам в каждом из конкретных очагов.

Проведенные исследования существенно дополнили представления о структуре популяций риккетсий в очагах клещевого риккетсиоза и ареалах риккетсий группы КПЛ в азиатской части России и Казахстане, что имеет большое значение для эпидемиологической характеристики очесов. Популяционные характеристики риккетсий являются одними из основных факторов, влияющих на эпидемическую активность очагов клещевого риккетсиоза.

В результате исследований разработаны новые методологические и методические подходы к изучению популяций риккетсий в природных очагах клещевого риккетсиоза с различной эпидемической активностью. Достижения в этой области связаны с совершенствованием методов выявления и изоляции риккетсий культивированием в экспериментальных линиях клещей, чувствительных линиях эукариотических клеток в сочетании с методами генотипирования и техникой моноклональных антител. Исследования в этом отношении в Омском НИИПИ были инициированы по предложению И.В. Тарасевич и David Н. Walker в 1996 г. В дальнейшем новые направления молекулярно-генетических исследований были реализованы в рамках сотрудничества НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (академик И.В. Тарасевич) и Средиземноморского университета, Франция (профессор Didier Raoult). Впервые описана новая риккетсия – R. tarasevichiae, названная в честь академика Ирины Владимировны Тарасевич. Определена высокая инфицированность клещей I. persulcatus этим микроорганизмом на ряде территорий России. Изолировано на культурах клеток Vero 14 штаммов, 8 из них депонированы во Всероссийском музее риккетсиальных культур.

Страница 1 | Страница 2 | Страница 3 | Страница 4

Читайте также:
»Иксодовые клещи и клещевые инфекции
»Клещевой риккетсиоз
»История изучения риккетсиоза
»Этиология, эпидемиология, клиника, диагностика и лечение риккетсиозов
»Микробиологическая и эпидемиологическая характеристика очагов клещевого риккетсиоза в Сибири и на Дальнем востоке России
»Клиника, диагностика и лечение клещевого риккетсиоза
»Фото переносчиков клещевого риккетсиоза

»Список сокращений