Экспериментальные методы изучения риккетсии в переносчиках |
|
Риккетсии
Отбор переносчиков для культивирования риккетсий и изучения уровня их вертикальной передачи проводится с использованием гемоцитового теста (взятие гемолимфы из ампутированной конечности и исследование полученных мазков в МФА) в следующей модификации. У клещей ампутируют только задние конечности, так как сохранение неповрежденными передних конечностей облегчает присасывание клеща при кормлении и не нарушает процесс копуляции. Ранее спонтанную инфицированность переносчиков определяли исследованием в МФА пунктата гемолимфы. Для этого стеклянным капилляром прокалывали мембрану у основания четвертой коксы клеща. Но эта методика является более трудоемкой и травматичной для клещей. Кормление пар клещей (самка и самец) проводится на взрослых лабораторных животных (белые мыши и морские свинки). Клещей помещают под колпак из полистирола, наклеенный на животное нетоксичным клеем (коллодием). С целью предотвращения снятия наклеек и счесывания клещей животным надевают жесткие воротники, ограничивающие подвижность. Клещи рода Dermacentor в наших экспериментах кормились в среднем 6-11 дней. Напитавшихся самок помещают в стеклянный контейнер, один конец которого закрывают влажной пробкой, другой - сухой. Контейнер представляет собой переработанную конструктивно и увеличенную в размерах камеру А.Б. Ланге (1957). Его изготавливают из стеклянной трубки диаметром 30-50 мм, длиной 300—400 мм. У концов трубки находятся отверстия с бортиками диаметром 10 мм, закрывающиеся ватно-марлевыми пробками. Контейнер для культивирования (или хранения) клещей готовят следующим образом. Плотно скатанный тампон из гигроскопической ваты с подобранными внутрь краями вставляют тыльной стороной в стеклянный цилиндр, закрытый этим тампоном, помещают в прозрачную посуду с дистиллированной водой до полного смачивания тампона, но не допуская просачивания воды внутрь. Внутри цилиндра поверхность тампона выравнивают с помощью деревянного цилиндрического пестика. В противоположный конец цилиндра вставляют сухую ватно-марлевую пробку, а в боковые отверстия с бортиками - малые ватно-марлевые пробки. Внутрь контейнера помещают гофрированную фильтровальную бумагу. При дальнейшей работе открывают только малые пробки. Контейнеры с клещами инкубируют в термостате при +28 °С в горизонтальном положении. Оптимальные условия влажности клещи выбирают сами в диапазоне от влажной до сухой ватно-марлевой пробки. Начало яйцекладки, по нашим наблюдениям, приходилось на 4—8-й день после кормления. Появившееся потомство содержат в серийных кормлениях-линьках «личинка - нимфа - имаго». Для кормления личинок и нимф используют сосунков белых мышей - сосунка помещают в стеклянный контейнер и с помощью тонкой кисточки наносят на них клещей (по одной особи или пулами - до 25 личинок и до 5 нимф). Для определения наличия риккетсий образцы появившихся личинок и нимф исследуют в МФА с поликлональными антителами к риккетсиям группы клещевой пятнистой лихорадки индивидуально как в голодном состоянии, так и после кормления на животных. Девять штаммов R. raoultii, не культивируемых на морских свинках и плохо культивируемых на куриных эмбрионах, были изолированы с использованием этой модели. Страница 1 | Страница 2 | Страница 3 | Страница 4 | Страница 5 | Страница 6 Читайте также: »Иксодовые клещи и клещевые инфекции »Клещевой риккетсиоз »История изучения риккетсиоза »Микробиологическая и эпидемиологическая характеристика очагов клещевого риккетсиоза в Сибири и на Дальнем востоке России »Клиника, диагностика и лечение клещевого риккетсиоза »Основные направления эпидемиологического надзора за риккетсиозами »Фото переносчиков клещевого риккетсиоза »Список сокращений |
|
|
|
|
|
|
|
Информация, представленная на сайте, является общедоступной и не может заменить квалифицированной консультации врача специалиста. Использование любых материалов сайта разрешается только при наличии прямой текстовой гиперссылки на главную страницу сайта entomologs.ru Все права защищены. © 2011-2022 Энтомологс.ру nikonaline@yandex.ru |
| Разное: |
